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非变性和变性聚丙烯酰胺凝胶的区别?“”体现

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  小木虫论坛-学术科研互动平台生物医药区分子生物综合其他非变性和变性聚丙烯酰胺凝胶的区别?“变性”体现在哪里?

  1. 变性胶加尿素或者其他变性剂,非变性胶是不加的。一般做RNA分离或回收、蛋白质分子量测定会使用变性PAGE,而DNA跑PAGE通常是采用非变性PAGE,另外回收活性蛋白也有用非变性PAGE的。2. SRAP(貌似叫什么...相关序列扩增多态性)标记这个应该是非变性PAGE,6%的PAGE胶配方就不用发了吧,google一下一大堆。TEMED和过硫酸铵都是最后加,混匀后再灌胶。

  Originally posted by墨池at 2011-07-21 20:57:19:1非变性和变性聚丙烯酰胺凝胶的区别?“变性”体现在哪里?2SRAP标记用6%聚丙烯酰胺凝胶电泳,是变性还是非变性?配方是什么?配胶时,过硫酸铵是不是要最后加入?谢谢(*^__^*) 嘻嘻1. “变性”体现在聚丙烯酰胺凝胶中加入尿素(一般跑DNA)或SDS(一般跑蛋白),另外,如果样品也要变性(DNA的loanding buffer也与普通的琼脂糖电泳所用的不同,同理所用Marker也不同;蛋白也要变性)。2.SRAP一般用变性的聚丙烯酰胺,毕竟片段还是比较小。

  3.配胶时不用加入过硫酸铵,灌胶前同时加入过硫酸铵(注意有毒!低温保存)和TEMED(也有毒,特臭)。

  另外,这些问题貌似分子克隆那本书非常详细,只不过SRAP标记较新而已,没有收录,但是检测方法是通用的。请多多看书,祝实验好运!

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